Journal of Gorgan University of Medical Sciences

fa جداسازی، کلونینگ و بیان سوپر آنتی ژن SPE استرپتوکوک دیس گالاکتیه با روش SDS page در بیماران مبتلا به پسوریازیس Isolation, Cloning, and Expression of Streptococcus dysgalactiae Subspecies Superantigen by SDS-PAGE in Psoriasis Patients میکروب شناسی Microbiology تحقيقي Original Articles زمینه و هدف: استرپتوکوک‌ها باکتری‌های گرم مثبت و بی‌هوازی هستند که به صورت زنجیره به دنبال هم قرار گرفته و از منابع متفاوت جدا می‌شوند. پروتئین speA یکی از فراورده‌های میکروبی است که از منابع مختلفی از جمله استرپتوکوکوس دیس گالاکتیه قابل استخراج است. پسوریازیس یک بیماری شایع، مزمن و عود کننده است که به خصوص در مراحل پیشرفته می‌تواند باعث عوارض متعدد جسمی و روحی در فرد بیمار گردد. این مطالعه به منظور جداسازی، کلونینگ و بیان سوپر آنتی ژن SPE استرپتوکوک دیس گالاکتیه با روش SDS page در بیماران مبتلا به پسوریازیس انجام شد. روش بررسی: این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی روی 60 نفر (26 مرد و 34 زن) مراجعه کننده به آزمایشگاه تشخیص طبی (27 نفر دارای پسوریازیس ناشی از عامل استرپتوکوک دیس گالاکتیه و 33 نفر غیرمبتلا) طی سال 1400 انجام شد. استرپتوکوک دیس گالاکتیه توسط آزمون‌های مختلف، تعیین هویت و جداسازی گردید. ژن speA توسط روش کلونینگ T-A با استفاده از وکتور PTG-19 در درون میزبان اشریشیاکلی Xl1 blue کلون گردید. بیان ژن کلون شده در کلونی‌های نوترکیب توسط روش SDS-PAGE بررسی شد. یافته‌ها: بررسی کلونی‌های نوترکیب وجود ژن speA را به اثبات رساند. بیان ژن speA در اشریشیاکلی X11 blue توسط روش SDS-PAGE به اثبات رسید. نتیجه‌گیری: سوپرآنتی‌ژن speA باکتری استرپتوکوک دیس گالاکتیه می‌تواند توسط روش T-A کلونینگ با استفاده از وکتور PTG-19 در درون میزبان اشریشیاکلیXl1 blue به خوبی بیان و تخلیص شده و به عنوان کاندید واکسن بیماری پسوریازیس مورد کارآزمایی‌های مناسب قرار گیرد. روش‌های مبتنی بر میکروب و تولید باکتری‌های نوترکیب روش‌هایی مقرون به صرفه برای تولید پروتئین‌ها با رویکرد اهداف درمانی و واکسیناسیون هستند. Background and Objective: Streptococci are Gram-positive and anaerobic bacteria that are isolated from different sources. These bacteria are capable of producing superantigens, toxins, and biologically-active substances and are therefore very important in the field of infectious disease. Streptococcal pyrogenic exotoxins A (speA) is produced by various bacteria, including Streptococcus dysgalactiae. This study aimed at the isolation, cloning, and production of speA from streptococci from the skin of psoriasis patients. Methods: In this descriptive-laboratory study, samples were taken from 60 psoriasis patients. S. dysgalactiae isolated were identified by different tests. The speA gene was cloned by the TA cloning method using PTG-19 vector into the Escherichia coli X11 blue as host. Expression of the cloned gene in recombinant colonies was evaluated by SDS-PAGE. Results: Screening of white recombinant colonies confirmed the presence of speA genes. Expression of the speA gene in E. coli X11 blue was confirmed by SDS-PAGE. Conclusion: Streptococcus superantigens can be considered as a rich source of vaccine production for different infections caused by these bacteria. By utilizing different cloning hosts and investigating optimal production conditions, S. dysgalactiae could be a candidate for future studies on vaccine production.   استرپتوکوک دیس گالاکتیه , اشریشیاکلی , ژن speA , کلونینگ , سوپر آنتی‌ژن , SDS-PAGE Streptococcus dysgalactiae,Escherichia coli,speA gene,Cloning,Superantigens,SDS-PAGE, 89 96 http://goums.ac.ir/journal/browse.php?a_code=A-10-2698-2&slc_lang=fa&sid=1 Kumarss Amini کیومرث امینی dr_kumarss_amini@yahoo.com 5900319475328460075565 5900319475328460075565 Yes Associate Professor, Department of Microbiology, Faculty of Science, Saveh Branch, Islamic Azad University, Saveh, Iran. دانشیار گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران. Ali Habbadi علی حبادی 5900319475328460075566 5900319475328460075566 No M.Sc in Microbiology, Faculty of Science, Saveh Branch, Islamic Azad University, Saveh, Iran. کارشناس ارشد میکروبیولوژی، دانشکده علوم، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران.