fa شناسایی گونه‌های فاسیولا با روش PCR-RFLP در شهرستان گرگان انگل‌شناسي Parasitology تحقيقي Original Articles <h1 dir="RTL" style="margin-top:0cm;margin-right:14.15pt;margin-bottom:0cm;margin-left:14.2pt;margin-bottom:.0001pt;page-break-after:auto;"><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف : امروزه شناسایی گونه‌های فاسیولا از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است. گونه‌های این جنس از انگل‌ها باعث فاسیولیازیس شده که از مهم‌ترین بیماری‌های مشترک در دام‌های اهلی و انسان‌ها است. این مطالعه به منظور شناسایی گونه‌های فاسیولا با روش </span></span></span></span><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">PCR-RFLP</span></span></span></span><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> در شهرستان گرگان انجام شد.</span></span></span></span></h1> <h1 dir="RTL" style="margin-top:0cm;margin-right:14.15pt;margin-bottom:0cm;margin-left:14.2pt;margin-bottom:.0001pt;page-break-after:auto;"><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">روش بررسی : در این مطالعه توصیفی کرم‌های فاسیولا از کبدهای آلوده گاو و گوسفند کشتارگاه گرگان جدا شد و استخراج ژن با روش فنل &ndash; کلروفرم انجام گردید. قطعه‌ای از ژنوم </span></span></span></span><a name="OLE_LINK22"></a><a name="OLE_LINK21"><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">ITS-1</span></span></span></span></a><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> تکثیر و با آنزیم </span></span></span></span><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">TasI</span></span></span></span><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">، آزمون </span></span></span></span><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">RFLP</span></span></span></span><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> روی قطعات تکثیریافته انجام شد و 8 نمونه تعیین توالی گردید.</span></span></span></span></h1> <h1 dir="RTL" style="margin-top:0cm;margin-right:14.15pt;margin-bottom:0cm;margin-left:14.2pt;margin-bottom:.0001pt;page-break-after:auto;"><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته‌ها : در مجموع 49 کرم فاسیولا از کبدهای آلوده گاو و گوسفند جداسازی شد. محصولات </span></span></span></span><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">PCR</span></span></span></span><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> تمام نمونه‌ها تحت تاثیر آنزیم </span></span></span></span><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">TasI</span></span></span></span><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> قرار گرفتند و گونه‌های هپاتیکا دوباند و گونه‌های ژیگانتیکا سه باند را نشان دادند. این آنزیم درگونه هپاتیکا یک قطعه 151 جفت بازی و یک قطعه 312 را نشان داد؛ ولی در گونه ژیگانتیکا سه قطعه 151، 93 و 219 جفت بازی بود. 36 کرم </span></span></span></span><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">(73.46%)</span></span></span></span><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> فاسیولا ژیگانتیکا و 13 کرم </span></span></span></span><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">(26.53%)</span></span></span></span><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> فاسیولا هپاتیکا تشخیص داده شدند. از 6 کبد آلوده گوسفندی، 22 کرم فاسیولا جدا گردید که 13 گونه هپاتیکا </span></span></span></span><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">(59.1%)</span></span></span></span><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> و 9 گونه ژیگانتیکا </span></span></span></span><span dir="LTR" style="layout-grid-mode:line;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">(40.9%)</span></span></span></span><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> تشخیص داده شدند. از 6 کبد آلوده گاوی، 27 کرم فاسیولا جدا گردید که همگی از گونه گاوی فاسیولا ژیگانتیکا (100درصد) شناسایی شدند.</span></span></span></span></h1> <h1 dir="RTL" style="margin-top:0cm;margin-right:14.15pt;margin-bottom:0cm;margin-left:14.2pt;margin-bottom:.0001pt;page-break-after:auto;"><span style="layout-grid-mode:line;font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری : گونه فاسیولا ژیگانتیکا گونه غالب در شهرستان گرگان است.</span></span></span></span></h1> <strong>Background and Objective: </strong>Identification of <em>Fasciola</em> species is important. Fascioliasis is one of the important diseases in animals and humans caused by genus <em>Fasciola</em>. This study was done to determine the identification of <em>Fasciola</em> species with RFLP-PCR in animal liver in Gorgan City, northern Iran.<br> <strong>Methods: </strong>In this descriptive study, worms were obtained from the livers of infected sheep and cattle in Gorgan slaughterhouse in northern Iran. DNA of worms was extracted with phenol- chloroform method. Fragment of ITS-1 genome was amplified and TasI enzyme was utilized for amplified fragments then 8 samples were sequenced.<br> <strong>Results: </strong>A total of 49 <em>Fasciola</em> worms were isolated from infected cattle and sheep. The PCR products of all specimens were affected by the TasI enzyme, and <em>F.hepatica</em> species showed two fragments and <em>F.gigantica</em> species indicated three fragments. The enzyme in <em>F.hepatica</em> species showed a fragment of 151 bp and a fragment of 312, but in the <em>F.gigantica</em>, three fragments were 151, 93 and 219 bp. 36 (73.46%) worms were identified as <em>Fasciola</em> gigantica and 13 (26.53%) worms were identified as <em>Fasciola</em> hepatica. Out of the six infected sheep liver, 22 were isolated from the <em>Fasciola</em> worms, 13 (59.1%) of which were <em>F.hepatica</em> and 9 (40.9%) of them were <em>F.gigantica</em>. Out of the six infected cattle liver, 27 <em>Fasciola</em> worms were identified, all of which were identified as <em>Fasciola</em> gigantica (100%).<br> <strong>Conclusion: </strong>This study showed that <em>Fasciola</em> gigantica is the dominant species in infected livers of the cattle in Gorgan city. کبد , گوسفند , گاو , فاسیولا هپاتیکا , فاسیولا ژیگانتیکا , PCR-RFLP Liver, Sheep, Cattle, Fasciola gigantica, Fasciola hepatica, RFLP-PCR 99 104 http://goums.ac.ir/journal/browse.php?a_code=A-10-1-999&slc_lang=fa&sid=1 A Halakou احمد هلاکو 5900319475328460049404 5900319475328460049404 No Ph.D Candidate in Parasitology, International Branch, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشجوی دکتری تخصصی انگل شناسی پزشکی، شعبه بین‌الملل، دانشگاه علوم پزشکی شهیدبهشتی، تهران، ایران H Khazan هوشنگ خزان khazan_h36@yahoo.co.in 5900319475328460049405 5900319475328460049405 Yes Associate Professor, Department of Parasitology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشیار گروه انگل شناسی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهیدبهشتی، تهران، ایران M Bendehpour مژگان بنده پور 5900319475328460049406 5900319475328460049406 No Associate Professor, Department of Biotechnology, Cellular and Molecular Biology Research Center, School of Advanced Technologies in Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشیار گروه بیوتکنولوژی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشکده فن‌آوری‌های نوین، دانشگاه علوم پزشکی شهیدبهشتی، تهران، ایران N Taghipour نیلوفر تقی پور 5900319475328460049407 5900319475328460049407 No Academic Instructor, Department of Parasitology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran مربی گروه انگل شناسی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهیدبهشتی، تهران، ایران B Kazemi بهرام کاظمی 5900319475328460049408 5900319475328460049408 No Professor, Department of Biotechnology, Cellular and Molecular Biology Research Center, School of Advanced Technologies in Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran استاد گروه بیوتکنولوژی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشکده فن‌آوری‌های نوین، دانشگاه علوم پزشکی شهیدبهشتی، تهران، ایران