fa اولین گزارش از کوتاه‌ترین زنجیره پروتئینی سیستئین پروتئاز B در کمپلکس لیشمانیا دنووانی و تفسیرهای بیوانفورماتیکی در ارتباط با این موتاسیون انگل‌شناسي Parasitology تحقيقي Original Articles <p style="font-style:normal;"></p> <p dir="RTL" style="font-style:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف :</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> <a name="OLE_LINK2"></a><a name="OLE_LINK1">بیماری کالاآزار یکی از مهم‌ترین بیماری‌های عفونی در شمال غربی کشور می‌باشد. </a>لیشمانیا اینفانتوم و لیشمانیا دنووانی هر دو متعلق به کمپلکس دنووانی و مسبب لیشمانیوز احشایی در کانون‌های مختلف دنیا هستند. در این مطالعه از ژن سیستئین پروتئاز </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">B</span></span></span> <span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">(CPB)</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> انگل‌های لیشمانیای جدا شده از پشه‌های خاکی برای تعیین هویت و بررسی خصوصیات ملکولی انگل در سطح اسیدنوکلئیک و اسیدآمینه استفاده گردید.</span></span></span></p> <p dir="RTL" style="font-style:normal;"></p> <p dir="RTL" style="font-style:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">روش بررسی :</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> در این مطالعه آزمایشگاهی بخشی از ژن </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">CPB</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> انگل‌های لیشمانیا به طول 741-702 جفت باز به کمک واکنش‌های زنجیره‌ای پلیمراز تکثیر و تعیین توالی شدند. سپس خصوصیات ملکولی آنها از قبیل جایگاه‌های دارای پتانسیل گلیگوزیلاسیون، محل‌های اتصال سلول‌های </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">B</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">T</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> و تاثیر جهش در ساختار سه بعدی پروتئین‌های حاصله به کمک نرم‌افزارهای بیوانفورماتیکی مورد بررسی قرار گرفتند.</span></span></span></p> <p dir="RTL" style="font-style:normal;"></p> <p dir="RTL" style="font-style:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته‌ها :</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> از 3477 پشه خاکی بررسی شده، 7 نمونه با واکنش </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">PCR</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> ژن سیستئین پروتئاز</span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">B</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> مثبت شدند. همچنین بر اساس یافته‌های این مطالعه در شمال غربی ایران هر دو عضو کمپلکس دنووانی یعنی </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">L.donovani</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">L.infantum</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> توسط پشه‌های خاکی فلبتوموس پرفیلیوی ترانسکوکازیکوس منتقل شده‌اند. بررسی توالی‌های </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> انگل‌ها نشان داد که یک نوکلئوتید سیتوزین به توالی ژن </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&nbsp;CPB</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">گونه دنووانی اضافه شده است که این امر باعث تغییر چهارچوب ترجمه به اسیدآمینه، ظهور یک کدون توقف</span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">(TGA) </span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;در هفت کدون پایین‌تر و توقف عملیات ترجمه شده است. در نتیجه یک زنجیره پپتیدی خیلی کوتاه به طول 76 اسیدآمینه ایجاد شده که بسیار کوتاه‌تر از زنجیره پپتیدی طبیعی به طول 234-247 اسیدآمینه در سایر استرین‌های لیشمانیا دونووانی کمپلکس می‌باشد. بررسی توالی‌های پروتئینی نشان داد که هیچ‌کدام از سه جایگاه گلیگوزیلاسیون و اپی‌توپ‌های سلول‌های </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">B</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">T</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> در پروتئین کوتاه استرین لیشمانیا دنووانی ایران وجود ندارد.</span></span></span></p> <p dir="RTL" style="font-style:normal;"></p> <p dir="RTL" style="font-style:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری :</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> زنجیره پروتئینی حاصل شده از نمونه‌های دنووانی ایران کوتاه‌ترین زنجیره پپتیدی این کمپلکس است که تا به حال در دنیا گزارش شده است. به نظر می‌رسد که کوتاه شدن زنجیره پپتیدی </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">CPB</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> می‌تواند در ارتباطات بین انگل- ناقل و نیز انگل - میزبان تاثیرگذار باشد. با توجه به اهمیت ژن سیستئین پروتئاز </span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">B</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> در برهم‌کنش انگل و سلول‌های میزبان و نقش کلیدی آن در ایجاد عفونت و گسترش بیماری کالاآزار، لازم است تا مطالعات بیشتری در مورد انگل لیشمانیا دونوانی جدا شده و پروتئین کوتاه آن انجام شود تا اپیدمیولوژی و سیمای واقعی بیماری کالاآزار در ایران کامل شود.</span></span></span></p> <p dir="RTL" style="font-style:normal;"></p> <p dir="RTL" style="font-style:normal;"><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;">کلید واژه‌ها : کمپلکس دنووانی ، کالاآزار ، ژن سیستئین پروتئاز</span></span></span><span dir="LTR" style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:8.0pt;">B</span></span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:tahoma,sans-serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> ، کنش متقابل انگل و میزبان ، ایران</span></span></span></p> Background and Objective: Visceral Leishmaniasis or Kala-azar is an important infectious disease in northwestern Iran. Members of the Leishmania donovani complex, L. donovani and L.infantum, are the two main parasites causing the disease in the world. In this study immunophenotype characters such as N-glycosylation, and T-cell and B-Cell epitopes of CPB gene was evaluated in the Leishmania parasites isolated from sandflies of the region. Materials and Methods: Partial of the CPB (702-741 bp) of Leishmania parasites was amplified and sequenced and used for bioinformatics analysis such as test three dimensional (3D) protein structure, N-glycosylation, and T-cell and B-Cell epitopes. Results: In 7 out of 3477 sand flies there was a positive PCR test for systeine protease B, gene. Also according to findings of this study, both agents of kala-azar L. donovani and L. infantum were bing transfered by sand flies of Phlbtomus perfiliewi transcaucasicus in North West Iran. DNA analysis of the CPB gene showed a cytosine insertion at 5&rsquo; end of the proofreading frame of the gene resulted in a stop codon (TGA) seven AA further down and hence translation is halted. This caused a short amino acid chain with only 76 AA much shorter than normal CPB peptide with 234-247 AA. This mutation has not been found in the L.infantum strain resulted in a normal CPB peptide. AA analysis showed no N-glycosylation site, T-cell and B-Cell epitopes on the short peptide of the L. donovani strain. Conclusion: This is the shortest CPB peptide chain reported for the L. donovani complex in the literature. This short peptide could have an effect on host-parasite and vector-parasite interactions. Since the CPBs genes have important implication on host&ndash;parasite and play key roles in infection and expression of the disease, further studies on the L. donovani parasite and its diminutive peptide necessitate to improve our understanding about the epidemiology of visceral leishmaniasis in Iran. کمپلکس دنووانی , کالاآزار , ژن سیستئین پروتئازB , کنش متقابل انگل و میزبان , ایران CPBs, Host–Parasite Interactions, Kala-azar, Leishmania donovani complex, Iran 33 41 http://goums.ac.ir/journal/browse.php?a_code=A-10-1-442&slc_lang=fa&sid=1 Maleki Ravasan N (MSc) ناصح ملکی راواسان 5900319475328460050995 5900319475328460050995 No Hide M (PhD) مالوریه هاید 5900319475328460050996 5900319475328460050996 No Javadian E (PhD) عزت الدین جوادیان 5900319475328460050997 5900319475328460050997 No Oshaghi MA (PhD) محمدعلی عشاقی 5900319475328460050998 5900319475328460050998 Yes Sadraei J (PhD) جاوید صدرایی 5900319475328460050999 5900319475328460050999 No