fa اثر توأم ملاتونین و آل- ترانس رتینوئیک‌اسید بر بلوغ، لقاح و تکوین رویانی تخمک‌های نارس موش در شرایط آزمایشگاهی بیولوژی تولید مثل Reproductive Biology تحقيقي Original Articles زمینه و هدف : با توجه به نقش آنتی‌اکسیدانی ملاتونین و رتینوئیک‌اسید به‌نظر می‌رسد این دو در میزان بلوغ و تکوین رویانی موثرند. این مطالعه به منطور تعیین اثر توأم ملاتونین و آل- ترانس رتینوئیک‌اسید بر بلوغ، لقاح و تکوین رویانی تخمک‌های نارس موش در شرایط آزمایشگاهی انجام گردید. روش بررسی : مجموعه تخمک- کومولوس (COCs) از تخمدان موش‌های ماده نژاد NMRI جمع‌آوری شدند و به‌طور تصادفی در محیط کشت بلوغ در شش گروه قرار گرفتند. گروه‌ها شامل کنترل، شم، آزمون1 (ملاتونین در غلظت‌های 100 نانومولار، 1 و 2 میکرومولار)، آزمون 2 (رتینوئیک‌اسید در غلظت‌های1، 2 ، 4 و 6 میکرومولار)، آزمون 3 (ملاتونین 2 میکرومولار و رتینوئیک‌اسید 4 میکرومولار) و آزمون 4 (ملاتونین 100 نانومولار و رتینوئیک‌اسید 4 میکرومولار) بودند. بعد از24 ساعت تخمک‌های بالغ با اسپرم لقاح داده شدند و تکوین رویانی تا مرحله بلاستوسیست به مدت پنج روز بررسی شد. یافته‌ها : میزان بلوغ تخمک‌ها در گروه کنترل 50.6% و در گروه شم 49.4% بود و بین دو گروه اختلاف آماری معنی‌داری مشاهده نشد. در گروه ملاتونین با غلظت‌های 100 نانومولار، 1 و 2 میکرومولار به ترتیب 54.3%، 54.8% و 59.9%، در گروه رتینوئیک‌اسید با غلظت‌های 6،4،2،1 میکرومولار به ترتیب 51.6%، 51%، 59% و 49.6% و در گروه 3 و 4 توأم به ترتیب 60.4% و 54.2% بود. میزان بلوغ تخمک در گروه 2 میکرومولار ملاتونین، گروه 4 میکرومولار رتینوئیک‌اسید و در گروه 3 توأم نسبت به گروه کنترل افزایش آماری معنی‌داری داشت (P<0.05). میزان تکوین در گروه ملاتونین در غلظت 100نانومولار، گروه رتینوئیک‌اسید در غلظت 4 میکرومولار و گروه 4 توأم نسبت به گروه کنترل افزایش آماری معنی‌داری داشت (P<0.05). گرچه میزان تکوین در گروه 3 توأم نسبت به گروه کنترل بیشتر بود؛ اما نسبت به غلظت 100نانومولار ملاتونین و 4 میکرومولار رتینوئیک‌اسید که به تنهایی استفاده گردید؛ کمتر بود. نتیجه‌گیری : اضافه کردن ملاتونین و آل-ترانس رتینوئیک‌اسید با هم به محیط کشت بلوغ، سبب افزایش بلوغ و بهبود تکوین جنین‌های حاصل از آنها به صورت وابسته به دوز می‌شود. Background and Objective: With respect to the antioxidant role of melatonin and retinoic acid, it seems to be effective both in the maturation and embryonic development. This study was done to investigate the effect of combination of melatonin and All-Trans retinoic acid (RA) on maturation, fertilization and embryonic development of immature mouse oocytes. Methods: In this experimental study, cumulus - oocyte complex (COCs) were recovered from 4-6 week old female mice NMRI and were divided into 6 maturation medium groups including control, sham, experiment 1(melatonin 100 nM, 1 and 2 &micro;M), experiment 2 (retinoic acid 1, 2, 4, 6 &micro;M), experiment 3 (melatonin 2 &micro;M+RA 4 &micro;M), experiment 4 (Mel 100nM + retinoic acid 4&micro;M). The maturation rate was recorded after 24 hours of culture in a humidified atmosphere of 5% CO2 at 37&deg;C. The matured oocytes were fertilized with sperm. Fertilization and embryonic development rates to the blastocyst stage were recorded. Results: Maturation rate in the control and sham groups were 50.6% and 49.4%, respectively. Maturation rate were 54.3%, 54.8%, 59.9% in melatonin group with concentrations of 100 nM, 1 and 2 &micro;M, respectively. Maturation rate were 51.6%, 51%, 59% and 49.6% in t-RA group with concentrations of 1, 2, 4, 6 &mu;M. Maturation rate were 60.4% and 54.2% in the experiment 3 and 4 groups, respectively. The maturation rates in the melatonin 2 &micro;M, retinoic acid 4 &micro;M and experiment 3 significantly increased in compare to control (P<0.05). The embryonic development rate in the melatonin with 100nM concentration and 4 &micro;M of retinoic acid increased significantly compared to controls (P<0.05). Although, embryonic development rate in experiment 3 was higher than control, but lower in compare to melatonin 100 nM and the retinoic acid 4 &micro;M. The embryonic development rate in experiment 4 significantly increased in compare to control (P<0.05). Conclusion: Combination of melatonin and All-Trans retinoic acid in medium culture increase maturation rate and improved embryonic development in dose dependent manner. ملاتونین , رتینوئیک‌اسید , بلوغ رویان , بلوغ تخمک , لقاح آزمایشگاهی , تخمک نارس Melatonin, Retinoic acid, In-vitro maturation, Immature oocytes, Embryonic development, Maturation rate, Mouse 46 54 http://goums.ac.ir/journal/browse.php?a_code=A-10-1-858&slc_lang=fa&sid=1 Tadayoni S سمیه تدینی لهی 5900319475328460049916 5900319475328460049916 No M.Sc Student of Anatomical Sciences, Faculty of Medicine, Mazandaran Univercity of Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی کارشناسی ارشد رشته علوم تشریح، دانشکده پزشکی ساری، دانشگاه علوم پزشکی مازندران Malekzadeh Shafarodi M مجید ملک زاده شفا رودی 5900319475328460049917 5900319475328460049917 No Assistant Professor, Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medicine, Mazandaran Univercity of Medical Sciences, Sari, Iran استادیار، گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی ساری، دانشگاه علوم پزشکی مازندران Ghasemi Hamidabadi H هاتف قاسمی حمیدآبادی 5900319475328460049918 5900319475328460049918 No Assistant Professor, Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medicine, Mazandaran Univercity of Medical Sciences, Sari, Iran استادیار، گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی ساری، دانشگاه علوم پزشکی مازندران Esmailnejad Moghaddam A امیر اسماعیل نژاد مقدم 5900319475328460049919 5900319475328460049919 No Associate Professor, Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medicine, Mazandaran Univercity of Medical Sciences, Sari, Iran دانشیار، گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی ساری، دانشگاه علوم پزشکی مازندران Khalilian A علیرضا خلیلیان 5900319475328460049920 5900319475328460049920 No Professor of Biostatistics, Department of Community Medicine, Faculty of Medicine, Research Center for Molecular Medicine, Mazandaran Univercity of Medical Sciences, Sari, Iran استاد آمار حیاتی، گروه پزشکی اجتماعی، دانشکده پزشکی ساری، دانشگاه علوم پزشکی مازندران Rezaei N نوراله رضائی nourrezaei@gmail.com 5900319475328460049921 5900319475328460049921 Yes Associate Professor, Department of Anatomical Sciences, Faculty of Medicine, Research Center for Molecular Medicine, Mazandaran Univercity of Medical Sciences, Sari, Iran دانشیار، گروه علوم تشریح، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی ساری، دانشگاه علوم پزشکی مازندران