fa تشخیص ژنوم روتاویروس با روش جدید رنگ‌آمیزی نیترات نقره ویروس شناسی Virology گزارش كوتاه Short Communication زمینه و هدف : روتاویروس‌ها عضو خانواده رئوویرویده و دارای ژنوم RNA دو رشته‌ای بوده و مهم‌ترین عامل گاستروانتریت در نوزادان و کودکان زیر سه سال است. این مطالعه به منظور ارزیابی تشخیص ژنوم روتاویروس با دو روش رنگ‌آمیزی تغییر شکل‌یافته نیترات نقره با استفاده از الکتروفورز ژل‌پلی‌آکریل‌آمید در مقایسه با رنگ‌آمیزی مرسوم نیترات نقره انجام شد. روش بررسی : در این مطالعه توصیفی روتاویروس از 6 نمونه استاندارد کشت سلولی MA-104 آلوده با دو ویروس RV4 انسانی و RF گاوی به‌صورت مجزا استخراج شد. RNA روتاویروس از نمونه‌ها استخراج و برای تشخیص حضور ژنوم روتاویروس، الکتروفورز در ژل‌پلی‌آکریل‌آمید 10درصد انجام گردید. با استفاده از رنگ‌آمیزی نیترات نقره باندهای RNA شناسایی شدند. یافته‌ها : پس از کشت سلول و تکثیر ویروس، آثار تخریب سلولی به صورت کنده شدن سلول‌ها از بستر مشاهده شد که نشان‌دهنده تکثیر ویروس در سلول‌ها بود. حرکت الکتروفورتیک dsRNA روتاویروس سویه‌ RF استاندارد براساس افزایش وزن مولکولی و حرکت در ژل‌پلی‌آکریل‌آمید از شماره 11-1 جداسازی شد و به‌صورت چهار قطعه سنگین، سه قطعه سه‌تایی، دو قطعه متوسط و دو قطعه کوچک با الگوی ژنومی گروه A روتاویروس تایید شد. رنگ‌آمیزی نقره و برآورد حساسیت روش با رقت‌های دوبرابری ژل مارکر مشاهده شد. کمترین رقت قابل اندازه‌گیری توسط این روش هفت پیکوگرم بود. همچنین با این روش در کمتر از 10 دقیقه رنگ‌آمیزی به‌طور مطلوب صورت گرفت. نتیجه‌گیری : روش جدید رنگ‌آمیزی نقره قابلیت تشخیص الگوی ژنومی ویروس‌ها در مدت زمان کمتر و برای نمونه‌های در حد هفت پیکوگرم را داراست. Background and Objective: Rotaviruses are the members of the Reoviridae family containing double-stranded RNA (dsRNA) genome which are the main cause of gastroinentritis particularly in children less than three years. This study was designed to evaluate the detection of rotavirus genome by new silver staining method using polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). Method: In this descriptive study, the samples were collected from infected MA-104 cell culture and the RNA electrophoresis was performed in 10% polyacrylamide slab gels after RNA extraction. Results: According to polyacrylamide gel electrophoresis and sensitive staining analysis, rotavirus RNA segments were divided into 4 groups and single-nucleotides differences were clearly detected rapidly. Conclusion: New silver staining method using polyacrylamide gel electrophoresis has the capacity to detect the rotavirus electeropherotype within a few minutes even in small DNA/RNA pieces up to 7 picograms. روتاویروس , الکتروفورز ژل‌پلی‌آکریل‌آمید , رنگ آمیزی نیترات نقره Rotavirus, Polyacrylamide gel electrophoresis, Silver staining 126 130 http://goums.ac.ir/journal/browse.php?a_code=A-10-1-802&slc_lang=fa&sid=1 Ahmadi E الهام احمدی 5900319475328460045748 5900319475328460045748 No M.Sc Student in Medical Virology, Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran دانشجوی کارشناسی ارشد رشته ویروس شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس Soleimanjahi H حوریه سلیمان جاهی soleim_h@modares.ac.ir 5900319475328460045749 5900319475328460045749 Yes Associate Professor, Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran دانشیار، گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس Teimoori A علی تیموری 5900319475328460045750 5900319475328460045750 No Assistant Professor, Department of Virology, Ahvaz Jundishapur University of Medical Science, Ahvaz, Iran استادیار گروه ویروس شناسی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز